연구 배경: Opsonophagocytic killing assay (OPA)는 폐렴구균 각종 혈청형에 대한 기능적 특이항체 측정을 위해 확립된 중요한 검사법이다. Group B Streptococcus (GBS) 감염에 대한 인체의 주요 방어 기전도 폐렴구균 방어 기전과 유사하여 식세포와 보체에 의한 항체-매개 옵소닌 작용에 의한다. 본 연구는 이와 같은 원리를 이용하여 University of Alabama at Birmingham의 Dr. Nahm에 의해 개발된 UAB GBS OPA를 인간 혈청을 대상으로 밸리데이션하였다. 방법: UAB GBS OPA에 사용되는 모든 실험 재료들 즉 침습성 질환 환자에서 분리된 5 개 혈청형의 GBS 균주 (Ia, Ib, II, III, V), 3-4 주 된 아기 토끼 보체, HL-60 세포 및 우태아혈청을 최적화하여 검증하였다. 최적화된 실험 재료들을 이용하여 건강한 성인에서 제조한 quality control (QC) 혈청 2종을 대상으로 UAB GBS OPA의 specificity, intra-assay precision 및 inter-assay precision을 수행하였다. 결과: UAB GBS OPA에 사용되는 토끼 보체 및 우태 혈청의 비특이살상력은 30% 미만으로 적절하였다. N-dimethylformamide 에 의해 분화된 HL 60 세포는 적절한 (≥80%) CD11b 및 CD35의 발현을 보였다. 분화된 HL-60 cell과 세균의 effector-to-target ratio가 200:1에서 800:1 범위에서 일관된 opsonization index (OI)가 얻어졌다. 각 GBS 혈청형 별 균액으로 시행한 특이도 실험에서 균액과 반응시킨 혈청은 적절한OI 억제를 보여주어 각각의 혈청형에 대한 OPA 특이도를 확인할 수 있었다(Figure 1). QC혈청들을 사용한 OPA의 intra- 및 inter-assay precision의 변이 계수는 각각11%-46% 및 12%-36%로 적절한 값을 보였다. 결론: 이화백신효능연구센터에서는 GBS 혈청형 Ia, Ib, II, III, 및 V에 대한 UAB GBS OPA를 인간 혈청을 대상으로 밸리데이션하여 지속적, 안정적으로 수행할 수 있도록 확립하였다. 본 방법은 현재 개발되고 있는 GBS 백신의 면역원성 평가와 다양한 인구 집단을 대상으로 하는 면역도 연구 등에 매우 유용하게 활용될 수 있을 것이다.